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磷酸化A-Raf抗體

  • 更新時(shí)間:  2023-09-14
  • 產(chǎn)品型號(hào):  
  • 簡(jiǎn)單描述
  • 磷酸化A-Raf抗體別 名:A raf 1; A Raf proto oncogene serine/threonine protein kinase; ARAF 1; ARAF; ARaf proto oncogene serine/threonine protein kinase; ARAF1; Oncogene Araf1; Oncogene PKS2; PKS 2; PKS; PKS
詳細(xì)介紹

商品屬性:

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

貨號(hào)

磷酸化A-Raf抗體

50ul、100ul、200ul

CS-A3721

商品詳情:
英文名稱:phospho-A Raf (Ser214)

   :A raf 1; A Raf proto oncogene serine/threonine protein kinase; ARAF 1; ARAF; ARaf proto oncogene serine/threonine protein kinase; ARAF1; Oncogene Araf1; Oncogene PKS2; PKS 2; PKS; PKS2; Proto oncogene Pks; RAFA 1; RAFA1; Ras binding protein DA Raf; v raf murine sarcoma 3611 viral oncogene homolog; v raf murine sarcoma 3611 viral oncogene homolog 1; v raf oncogene homolog 1 (murine sarcoma 3611 virus); ARAF_HUMAN.

產(chǎn)品類型磷酸化抗體

研究領(lǐng)域:腫瘤  細(xì)胞生物  染色質(zhì)和核信號(hào)  神經(jīng)生物學(xué)  信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)  細(xì)胞凋亡  轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子  激酶和磷酸酶  G蛋白偶聯(lián)受體

抗體來源:Rabbit

克隆類型:Polyclonal

交叉反應(yīng):Human,  (predicted: Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, )

產(chǎn)品應(yīng)用:ELISA=1:5000-10000 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500 (石蠟切片需做抗原修復(fù))

not yet tested in other applications.

optimal dilutions/concentrations should be determined by the end user.

理論分子量:67kDa

細(xì)胞定位:細(xì)胞漿

   :Liquid

   :1mg/ml

:KLH conjugated Synthesised phosphopeptide derived from human A Raf around the phosphorylation site of Ser214: ST(p-S)TP

   :IgG

純化方法:affinity purified by Protein A

保存條件:Shipped at 4℃. Store at -20 °C for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles.

注意事項(xiàng):This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.

Function:

Involved in the transduction of mitogenic signals from the cell membrane to the nucleus.


實(shí)驗(yàn)原理 :

1)公司產(chǎn)品僅用于科研特異性結(jié)合抗原:抗體本身不能直接溶解或殺傷帶有特異抗原的靶細(xì)胞,通常需要補(bǔ)體或吞噬細(xì)胞等共同發(fā)揮效應(yīng)以清除病原微生物或?qū)е虏±頁(yè)p傷。然而,抗體可通過與病毒或毒素的特異性結(jié)合,直接發(fā)揮中和病毒的作用。

2)活補(bǔ)體:IgM、IgG1、IgG2和IgG3可通過經(jīng)典途徑激活補(bǔ)體,凝聚的IgA、IgG4和IgE可通過替代途徑激活補(bǔ)體。

3)結(jié)合細(xì)胞:不同類別的免疫球蛋白,可結(jié)合不同種的細(xì)胞,參與免疫應(yīng)答。

4)可通過胎盤及粘膜:免疫球蛋白G(IgG)能通過胎盤進(jìn)入胎兒血流中,使胎兒形成自然被動(dòng)免疫。免疫球蛋白A(IgA)可通過消化道及呼吸道粘膜,是粘膜局部抗感染免疫的主要因素。

5)具有抗原性:抗體分子是一種蛋白質(zhì),也具有刺機(jī)體產(chǎn)生免疫應(yīng)答的性能。不同的免疫球蛋白分子,各具有不同的抗原性。

6)抗體對(duì)理化因子的抵抗力與一般球蛋白相同:不耐熱,60~70℃即被破壞。各種酶及能使蛋白質(zhì)凝固變性的物質(zhì),均能破壞抗體的作用。抗體可被中性鹽類沉淀。在生產(chǎn)上常可用硫酸銨或硫酸鈉從免疫血清中沉淀出含有抗體的球蛋白,再經(jīng)透析法將其純化。

一抗和二抗的區(qū)別:

第一抗體就是平常所說的抗體,即能和抗原特異性結(jié)合。

第二抗體是能和抗體結(jié)合的,即抗體的抗體。主要用于檢測(cè)抗體的存在。

一抗是針對(duì)抗原的抗體,二抗是針對(duì)一抗的抗體。即抗體也可以充當(dāng)抗原刺激機(jī)體產(chǎn)生抗體。也就是說,抗原進(jìn)入機(jī)體刺激機(jī)體免疫系統(tǒng)產(chǎn)生免疫應(yīng)答,由B細(xì)胞可以產(chǎn)生與相應(yīng)抗原發(fā)生特異性結(jié)合的特殊蛋白質(zhì)。

一抗二抗都是一種可以特異結(jié)合別的物質(zhì)的基團(tuán),而且一抗可以至少結(jié)合兩種其他基團(tuán)(底物和二抗)。

一抗:可以特異結(jié)合底物,就是識(shí)別出我們想要檢測(cè)的東西。一抗和底物結(jié)合與否用肉眼是看不出來的。

二抗:可以和一抗結(jié)合,并帶有可以被檢測(cè)出的標(biāo)記(如帶熒光、放射性、化學(xué)發(fā)光或顯色基團(tuán)),作用是檢測(cè)一抗。 如果一抗自己帶有可以被檢測(cè)出的標(biāo)記(如帶熒光、放射性、化學(xué)發(fā)光或顯色基團(tuán)),則不需要二抗。但這樣成本很高,因?yàn)橐环N一抗只識(shí)別一種底物。所以如今的設(shè)計(jì)一般是二抗帶上可檢測(cè)標(biāo)記,再來檢測(cè)一抗。而一抗識(shí)別底物。這樣,當(dāng)一抗結(jié)合到底物上,就可以通過二抗檢測(cè)出來。

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抗體的標(biāo)記實(shí)驗(yàn)要點(diǎn):

1.如在反應(yīng)混合液中有疊氮鈉或游離氨基存在,會(huì)抑制標(biāo)記反應(yīng)。因此,蛋白質(zhì)在反應(yīng)前要對(duì) 0.1mol/L緩沖液或0.5mol/L硼酸緩沖液充分透析;

2.所用的NHSB及待化蛋白質(zhì)之間的分子比按蛋白質(zhì)表面的ε-氨基的密度會(huì)有所不同,選擇不當(dāng)則影響標(biāo)記的效率,應(yīng)先用幾個(gè)不同的分子比來篩選最適條件;

3.用NHSB量過量也是不利的,抗原的結(jié)合位點(diǎn)可能因此被封閉,導(dǎo)致抗體失活;

4.由于抗體的氨基不易接近可能造成化不足,此時(shí)可加入去污劑如 Triton x-100, Tween20等;

5.當(dāng)游離ε-氨基(賴氨酸殘基的氨基)存在于抗體的抗原結(jié)合位點(diǎn)時(shí),或位于酶的催化位點(diǎn)時(shí),化會(huì)降低或損傷抗體蛋白的結(jié)合力或活性;

6.還可能與不同的功能基團(tuán),如羰基、氨基、巰基、異咪唑基及基,也可與糖基共價(jià)結(jié)合;

7.交聯(lián)反應(yīng)后,應(yīng)充分透析,否則,殘余的會(huì)對(duì)化抗體與親和素的結(jié)合產(chǎn)生競(jìng)爭(zhēng)作用;

8.在細(xì)胞的熒光標(biāo)記實(shí)驗(yàn)中,中和親和素的本底低,但由于鏈霉親和素含有少量正電荷,故對(duì)某些細(xì)胞可導(dǎo)致高本底。

 



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